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提供ACTH放免試劑盒,ACTH放免實驗檢測

更新時間:2019-03-04      瀏覽次數(shù):2097

提供ACTH放免試劑盒,ACTH放免實驗檢測

ACTH是由垂體前葉細胞分泌的39個氨基酸組成的直鏈多肽,分子量4500,在循環(huán)中的半衰期僅為10~25min。ACTH的生理作用為促進腎上腺皮質(zhì)增生、合成和分泌皮質(zhì)類固醇,同時也促時腎上腺素、生長激素合成。ACTH的合成和分泌受下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)、腎上腺皮質(zhì)激素以及加壓素的調(diào)節(jié)。我們利用ACTH的18~39片段的特異抗體,建立了特異、靈敏的測定血漿、體液中ACTH18-39片段的放射免疫分析方法。該抗體也能同組織、細胞切片中特異的ACTH和體外純化的ACTH特異結(jié)合,用于研究組織化學(xué)診斷ACTH水平變化。因此該方法適用于腎上腺皮質(zhì)功能亢進、異位ACTH綜合征、腎上腺腺瘤上腺皮質(zhì)功能減退等諸多研究疾病時血漿ACTH水平的監(jiān)測。 

標準ACTH 溶液:使用前用緩沖液1ml溶解,混勻。2~8℃避光保存,在標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定,濃度分別為0、5、15、45、135、405pg/ml。

125I- ACTH溶液:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混勻。如一次加樣超過100管,兩瓶混合后使用;2~8℃避光保存標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。

 

兔抗-ACTH  抗血清:使用前用緩沖液(100管10.5ml溶解,50管5.5ml

溶解),混勻。如一次加樣超過100管,兩瓶混合后使用;2~8℃避光保存標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。

 

驢抗兔免疫分離試劑:1瓶,液體,2~8℃保存,在標識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。加樣前必須搖勻!

 

取靜脈血2ml,注入含10%EDTA二鈉30ul的試管中,混勻4℃,3000rpm離心10 min,分離血漿,待測;如不立即測量,可將樣本密封后,置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y,2~8℃保存不應(yīng)超過48小時,-20℃保存不超過2個月。冰凍樣品測定前,

2.手工作圖或計算器處理:

1).百分結(jié)合率計算:設(shè)S0管計數(shù)為B0,各標準管或樣品管計數(shù)為B,非特異管計數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計算公式如下:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%

2).logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式如下:

    logit=ln(B/ B0)/(1-B/ B0)

3)手工作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應(yīng)的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,對應(yīng)的B/B0為縱坐標在logit-log坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線)。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是后的濃度值。

4).計算器處理;使用有線性擬合功能的計算器,可以比較方便地計算出樣品濃度值,具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

本測定盒主要技術(shù)指標

1.標準范圍:5—405pg/ml

2.靈敏度:<5pg/ml

3.批內(nèi)變異系數(shù)(CV):<10%;

 批間變異系數(shù)(CV):<15%

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