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丙二醛含量測(cè)試盒真的太棒了!

更新時(shí)間:2017-12-05      瀏覽次數(shù):2206

丙二醛含量測(cè)試盒真的太棒了!

測(cè)定意義:
 

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過(guò)氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合
物,其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA 的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。

 

測(cè)定原理:
 

MDA 與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm 有zui大吸收
峰,進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量;同時(shí)測(cè)定600nm 下的吸光度,利用532nm
與600nm 下的吸光度的差值計(jì)算MDA 的含量。

 

需自備的儀器和用品:
 

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、
研缽、冰和蒸餾水。

 

試劑的組成和配置:
 

提取液:液體100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存;

 

MDA 提?。?/strong>

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
(104 個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL 提
取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30 次);
8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約0.1g 組織,
加入1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)

注意事項(xiàng):
 

臨用前注意試劑一是否*溶解,如未溶解,可以70℃-90℃加熱,并振蕩以促進(jìn)溶解。

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